(一)操作室厭氧環(huán)境形成：

　　1.按使用要求放置好必要的附件和器具；

　　2.通電源開(kāi)照明燈，開(kāi)溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度；

　　3.操作室內(nèi)放入鈀粒(封閉)和干燥劑，并放入美蘭指示紙(封閉)；

　　4.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門(mén)，并抽真空校驗(yàn)；

　　5.操作室內(nèi)氮?dú)庵脫Q：

　　A，把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊

　　B.接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開(kāi)氮?dú)饪刂崎y，使手套鼓起，關(guān)閉閥門(mén)，然后扎緊袋口；

　　6.操作室氮?dú)庵脫Q重復(fù)一次充氮過(guò)程，取樣室先抽真空，并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。如此連續(xù)三次氮?dú)庵脫Q。

　　7.操作室第四次置換(混合氣體置換)：(混合氣體配比為N285%、H210%、CO25%)

　　A.調(diào)換氣路打開(kāi)混合氣閥進(jìn)氣，充氣時(shí)取樣室先抽真空，并隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣；

　　B.關(guān)掉混合氣體閥，并打開(kāi)閥，使混合氣體經(jīng)過(guò)流量計(jì)，調(diào)整流量計(jì)，流量為每分鐘10ml左右；

　　C.混合氣體重復(fù)2-3次轉(zhuǎn)換，經(jīng)過(guò)上述過(guò)程，基本形成厭氧環(huán)境。

　　8.操作室內(nèi)打開(kāi)粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一小時(shí)后打開(kāi)美蘭指示紙觀察其情況，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境；

　　9.開(kāi)紫外線燈，室內(nèi)進(jìn)行處理，時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。

　　(二)菌種的置入和培養(yǎng)：

　　1.檢查取樣室內(nèi)門(mén)并關(guān)緊；

　　2.打開(kāi)取樣室外門(mén)，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén)；

　　3.取樣室充氮置換三次過(guò)程：打開(kāi)真空泵，先抽真空度，然后人工打開(kāi)氮?dú)忾y進(jìn)氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉氮?dú)忾y。重復(fù)操作一次。第三次操作時(shí)，然后打開(kāi)混合氣體閥進(jìn)混合氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉混合氣體閥。取樣室充氮置換三次過(guò)程結(jié)束；

　　4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)；

　　5.取樣室外門(mén)開(kāi)啟、關(guān)緊，再抽低真空度檢驗(yàn)；

　　6.厭氧培養(yǎng)箱需要連續(xù)使用的條件：

　　A.每天在操作室內(nèi)打開(kāi)美蘭指示紙觀察，如不正常就重新?lián)Q氣；

　　B.要連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难踅Y(jié)合通過(guò)催化吸收，保證室內(nèi)厭氧狀態(tài)；

　　C.連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行，更換一次除氧劑和干燥劑。

　　D.操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制。

　　7.混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力左右。

　　厭氧箱發(fā)注意事項(xiàng)

　　1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方；

　　2.開(kāi)機(jī)前應(yīng)熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說(shuō)明，掌握正確使用方法；

　　3.培養(yǎng)物放入是在操作室內(nèi)達(dá)到優(yōu)良厭氧環(huán)境后放入；

　　4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持10小時(shí)厭氧狀態(tài)(超過(guò)10小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)；

　　5.經(jīng)常注意氣路有無(wú)漏氣現(xiàn)象；

　　6.調(diào)換氣瓶時(shí)，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體；真空泵按要求使用，定期檢查加油。